你知道什么是多肽的純度么?今天就讓我們一起來了解一下吧。
多肽的純度是指HPLC方法在214nm處檢測到的目標多肽的含量(214nm是肽鏈的吸收波長),紫外分光光度計檢測不到水和殘留的鹽不。
可發現其他的雜質包括:缺失序列(缺失了一個或多個氨基酸殘基的靶序列),截斷序列(加帽過程中產生的序列)(專肽生物)脫保護不*序列(產生于整個合成過程或最后的裂解過程)。
多肽純化不涉及水和鹽。HPLC純化會產生少量的TFA,如:游離的氨基末端和其他側鏈如Arg、Lys、His都可生成少量TFA雜質。
通常交付的多肽多含有微量TFA和殘留水。即使處于凍干狀態,水也會因共價結合的能力不同而不同程度地存在著。
肽凈含量不同于多肽純度。肽凈含量是指與非肽物質(主要為抗衡離子和水)相比的多肽量??赏ㄟ^氨基酸分析來確定肽凈含量。通常,親水性多肽即使在嚴格的凍干狀態下,也會吸收微量的水。因純化和凍干工藝,會導致不同批次的肽凈含量有所不同。
在多肽中還存在哪些其他物質(雜質)?
純化前的多肽中包含的雜質包括多肽和非多肽物質, 純化后的多肽中包含的雜質除了TFA鹽,大多數為序列被修改的多肽。
1.缺失了一個或多個氨基酸殘基的靶序列
2.為避免缺失序列的產生而進行的加帽操作,截斷序列即產生于加帽過程中
3.產生于整個合成過程或最后的裂解過程
4.保護基重新附著在多肽的其他位置
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